Anticoagulant lupic (LAC)

Informatii generale

Anticoagulantii lupici sunt autoanticorpi impotriva complexelor fosfo-lipo-proteice. Determinarea anticoagulantilor lupici este o investigatie utila pentru diagnosticul sindromului antifosfolipidic: boala autoimuna caracterizata prin fenomene trombotice recurente (tromboze venoase si / sau arteriale), pierderi recurente de sarcina (avorturi spontane, infertilitate, complicatii ale sarcinii), etc. Prezenta anticoagulantilor lupici de regula asociaza valori prelungite ale aPTT, valori prelungite ale PT care se corecteaza cu mix de plasma normala 1:1.

Anticoagulantii lupici sunt un grup heterogen de autoanticorpi orientati impotriva fosfolipidelor anionice (fosfolipide electronegative: de exemplu cardiolipina / CL, fosfaditilserina / PS) sau impotriva anumitor complexe proteice (beta 2 glicoproteina I / b2GPI,  anumiti factori ai coagularii factorul II coagularii – protrombina, anexina V, etc). Ternenul de anicoagulant este un denumire improprie deoarece in-vitro acesti auto-anticorpi prelungesc timpii de coagulare dar in-vivo acesti autoanticorpi genereaza o stare pro-coagulanta: tromboze recurente.

Diagnosticul sindromului antifosfolipidic (APS – antiphospholipidic syndrome) este un diagnostic serologic care se bazeaza pe pozitivarea anumitor markeri serologici. Pentru stabilirea diagnosticului de sindrom antifosfolipidic, in 2023, Colegiul American de Reumatologie (ACR / American College of Rheumatology) si Liga Europeana de Asociatii pentru Reumatologie (EULAR / European Alliance of Associations for Rheumatology) recomanda folosirea urmatoarelor trei teste de prima intentie:

• un test functional coagulometric LAC (anticoagulant lupic screen – LAC screen dAPTT si anticoagulant lupic screen – LAC screen dRVVT);
• doua teste imunoenzimatice de tip ELISA: – anticorpi anti-cardiolipinici aCL (aCL – IgG si aCL-IgM autoanticorpi impotriva cardiolipinei un fosfolipid electronegativ prezent la nivelul membranei mitocondriale),  anticorpi anti-beta 2 glicoproteina I / ab2GPI – IgG si ab2GPI – IgM – complex glicoproteic transmembranar). Deoarece exista o mare variabilitate de expresie a acestor autoanticorpi, in cazurile neconcludente se recomanda testarea anticorpilor antifosfolipidici care identifica autoanticorpii fata de mai multe fosfolipide anionice electro-negative (cardiolipina, fosfaditilserina) dar si autoanticorpii fata de fosfolipidele neutre (fosfaditilcolina).

Efecturaea testului anticoaagulant lupic  LAC – test functional (coagulometric) implica doua etape:

• etapa 1 – test LAC screening dAPTT & dRVVT – (dilute Activated Plasma Prothrombin Time / dAPTT & dRVVT dilute Russel Venin Venom Time) – test efecuat cu concentratii reduse (diluate) ale fosfolipidelor care in-vitro vor accentua efectul anticoagulant al anticoagulantului lupic (valori prelungite ale testului la subiectii cu anticoagulant lupic prezent). Timpul de coagulare se corecteaza cu mix de 1:1 de plasma normala (control normal) : plasma de pacient cu anticoagulanti lupici. Se noteaza raportul dintre  timpul de coagulare al pacientului / timpul de coagulare al plasmei de control. Valori normale ale raportului R intre 0.80 – 1.20; anticoagulant lupic slab pozitiv valori ale raportului R intre 1.2 – 1.5, anticoagulant lupic moderat pozitiv valori ale raportului R  intre 1.5 – 2.0, anticoagulant lupic intens pozitiv valori ale raportului R peste 2.0. Probele se lucreaza in duplicat (1 p plasma pacient / control normal, 1 p reactiv R1 – timp de coagulare subiectii normali 45 – 60 secunde, timp de coagulare subiecticii cu lupus anticoagulant pozitiv 90 – 120 secunde).

• etapa 2 – test LAC confirm – test LAC de confirmare – efectuat cu concentratii crescute ale fosfolipidelor (fosfolipide in bistrat sau in faza hexagonala) – spre deosebire de reactivul R1, reactivul R2 contine aceleasi componente dar in plus are concentratii crescute de fosfolipide. Valorile normale ale raportului R intre 0.80 – 1.20 confirma prezenta anticoagulantului lupic. Probele se lucreaza in duplicat (1 p plasma pacient / control normal, 1 p reactiv R2 – timp de coagulare subiectii normali  40 – 60 secunde, timp de coagulare subiectii cu alti inhibitori ai coagularii 80 – 120 secunde).

Raportul normalizat (RN) – calcularea unui raport normalizat este utila pentru corectarea diferentelor dintre combinatiile instrument / reactiv. RN foloseste valorile medii ale timpilor de coagulare . Folosirea RN imbunatateste diferentele dintre probele LA slab pozitive si cele negative sau cele la care exista si alti inhibitori.

• RN = (TC-R1 pacient / media TC-R1 plasma normala) / (TC-R2 pacient / media TC-R2)
• RN = raport normalizat = [timp de coagulare R1 – pacient / valori medii ale timpului de coagulare R1 plasma normala] / [ timp de coagulare R2 pacient / valori medii ale timpului de coagulare R2 plasma normala].

Sunt posibile urmatoarele situatii:

ANTICOAGULANT LUPIC – ABSENT

• • test LAC screen – rezultat normal (R sau RN < 1.2);
  • test LAC screen mix 1:1 – rezultat normal (R sau RN < 1.2);
  • test LAC confirm – rezultat normal (R sau RN < 1.2);
  • test LAC confirm mix 1:1 – rezultat normal (R sau RN < 1.2)

ANTICOAGULANT LUPIC PREZENT

• • test LAC screen – rezultat anormal (R sau RN > 1.2);
  • test LAC screen mix 1:1 – rezultat normal (R sau RN < 1.2);
  • test LAC confirm – rezultat normal (R sau RN < 1.2);
  • test LAC confirm mix 1:1 – rezultat normal (R sau RN < 1.2)

DEFICIENTE ALE FACTORILOR COAGULARII / TERAPIE ANTICOAGULANTE ORALE

• test LAC screen – rezultat anormal (R sau RN > 1.2);
• test LAC screen mix 1:1 – rezultat normal (R sau RN < 1.2);
• test LAC confirm – rezultat anormal (R sau RN > 1.2);
• test LAC confirm mix 1:1 – rezultat normal (R sau RN < 1.2)

ANTICOAGULANT LUPIC PREZENT + DEFICIENTE ALE FACTORILOR COAGULARII

• test LAC screen – rezultat anormal (R sau RN > 1.2);
• test LAC screen mix 1:1 – rezultat anormal (R sau RN > 1.2);
• test LAC confirm – rezultat anormal (R sau RN > 1.2);
• test LAC confirm mix 1:1 – rezultat normal (R sau RN < 1.2)

PREZENTA ALTOR INHIBITORI ai sistemului coagularii

• test LAC screen – rezultat anormal (R sau RN > 1.2);
• test LAC screen mix 1:1 – rezultat anormal (R sau RN > 1.2);
• test LAC confirm – rezultat anormal (R sau RN > 1.2);
• test LAC confirm mix 1:1 – rezultat anormal (R sau RN >1.2)

Utilitatea testului:

• evaluare tromboze arteriale, venoase, trombofilie;
• evaluare boli autoimune (lupus, tiroidite, etc);
• pierderi recurente de sarcina, infertilitate, sindrom antifosfolipidic.

Bibliografie: