- material biologic: ser / vacutainer fara anticoagulant sau cu activator de cheag (cu dop rosu sau galben); transport la rece – ferit de lumina – folie de aluminiu pentru protectie; dupa formarea cheagului, proba se centrifugheaza in aceeasi zi obtinand serul; stabilitate proba – 2 zile la 2 – 8 grC (ser centrifugat), 1 luna la – 20 grC (ser congelat) se congeleaza o singură data;
- metoda: chemilumineascenta (CLIA);
- termen de executie: 3 – 7 zile.
- determinarea vitaminei B12 – investigatie utila pentru diagnosticul si monitorizarea deficitului de vitamina B12 / ciancobalamina; tabloul clinic include macrocitoza si anemia megaloblastica precum si tulburări neurologice (tulburari cognitive, neuropatie senzoriala, ataxie, etc).
- determinarea vitaminei B12 forma activa / holoTC – holotranscobalamina – investigatie utila pentru diagnosticul formelor precoce ale deficitului de vitamina B12 (valori normale ale vitaminei B12) la care tabloul clinic este putin sugestiv pentru aceasta deficienta vitaminica si include manifestari neurologie discrete (oboseala, tulburari de comportament, neuropatie senzoriala) fara manifestari hematologice.
Deoarece deficitul vitaminei B12 se poate asocia cu deficitul folatului (vitamina B9) este importanta dozarea concomitenta si a folatului seric pentru o conduita terapeutica adecvata.
Vitamina B12 este cofactor (impreuna cu acidul folic / vitamina B9) pentru conversia homocisteinei in metionina; determinarea homocisteinei circulante – este utila pentru cuantificarea accidentelor vasculare cerebrale ischemice tranzitorii ce determina aparitia fenomenelor neurologice mai ales la varsnici: declin cognitiv, tulburari neurologice, dementa vasculara, oboseala, etc;
Vitamina B12 este cofactor pentru conversia metilmalonil CoA (conzima A) in succinil CoA; blocarea acestei reactii metabolice duce la acumularea acidului metilmalonic seric – aceasta determinare este utila pentru identificarea fazelor incipiente de deficit de vitaminamina B12.
Vitamina B12 (ciancobalamina sau „vitamina rosie”) este o molecula hidrosolubila cu o structura extrem de complexa ce contine un atom de cobalt; aceasta vitamina nu poate fi sintetizata de organismul uman si de aceea folosirea acestei molecule complexe se face intr-un mod foarte economic – dupa absorbtie, folosire si eliminare aceasta molecula este in mare parte reabsorbita.
Absorbtia vitaminei din alimentatie se face cu ajutorul FI / factorului intrinsec care este secretat de mucoasa gastrica; in anemia pernicioasa (boala autoimuna caracterizata prin atrofia stomacului) exista un deficit de vitamina B12 ca urmare a lisei secretiei FI. Complexul vitamina B12 – FI se absoarbe intestinal la nivelul ileonuli . Dupa absorbtie, vitamina B12 circula legata de doua proteine: 1/ transcobalamina (TC) iar complexul vitamina B12 – TC / holoTC reprezinta 20 – 30% din totalul vitaminei B12 circulante si reprezinta fractia activa disponibila metabolic si 2/ haptocorina (HC) iar complexul vitamina B12 – HC reprezinta fractia inerta. Vitamina B12 are un rol important in metabolismul propionatului, al aminoacizilor si in transferul unui atom de carbon (impreună cu vitamina B9 / acid folic, vitamina B6 / piridoxina, vitamina B2 / riboflavina).
Cobalamina este implicata in mai multe procese metabolice:
- cofactor pentru conversia metilmalonil CoA (conzima A) in succinil CoA; blocarea acestei reactii metabolice duce la acumularea acidului metilmalonic seric, determinare utila in identificarea fazelor incipiente de deficit de vitaminamina B12. Acidul metilmalonic este un indicator al proceselor de imbatranire celulara avansata (ageing) cu accelerarea proceselor de fibroza si inflamatie. Tabloul clinic asociat acidemiei metilmalonice include fibroza hepatica, afectarea muschilor scheletici (miopatie, oboseala musculara), cardiomiopatie si insificienta renala iar la subiectii cu afectiuni maligne valorile crescute ale acidului metilmalonic accelereaza progresiunea cancerului.
- cofactor (impreuna cu acidul folic / vitamina B9) pentru conversia homocisteinei in metionina; blocarea acestei reactii metabolice duce la acumularea homocisteinei circulante – determinare utila pentru cuantificarea accidentelor vasculare cerebrale ischemice tranzitorii ce determina aparitia fenomenelor neurologice mai ales la varsnici: declin cognitiv, tulburari neurologice, dementa vasculara, oboseala, etc; Fenomenele neurologice sunt primele care apar mult inaintea simptomatologiei hematologice. Aceasta etapa metabolica induce si tulburari ale sintezei mielinei cu tablou clinic ce asociaza neuropatia senzitiva, ataxie, etc.
- cofactor (impreuna cu acidul folic / vitamina B9) pentru sinteza ADN-ului (sinteza purinelor) – ca urmare a blocarii acestor reactii au loc insuficienta maturarea a globulelor rosii (anemie macrocitara), insuficienta maturare a globulelor albe (usoara aplazie medulara cu devierea la stanga a formulei leucocitare), glosita (tulburari date de insuficienta regenerare celulara cu turn-over crescut). Nota: deoarece deficitul vitaminei B12 se poate asocia cu deficitul folatului (vitamina B9) este importanta dozarea concomitenta si a folatului seric pentru o conduita terapeutica adecvata. Administrarea in exces a vitaminei B12 poate accelera procesele replicare ale materialului genetic.
Deficitul vitaminic este intalnit in rezectii gastrice, malabsorbtie sau aport insuficient (alcoolism, anorexie, deficit de TC – dietele vegetariene, boala Chron, parazitoze / botriocefaloza), pierderi crescute (dializa) sau iatrogen (consecutiv andimistratii medicatiei anticonvulsivante, antiacide / ranitidina, etc). Chiar si la vegetarieni hipovitaminoza B12 apare rar, deoarece in microbiota intestinala exista microorganisme producatoare de B12. Fiind o vitamina hidrosolubila, toxicitatea vitaminei B12 nu a fost identificata in practica clinica curenta.
Sursele naturale de vitamina B12 sunt exclusiv de origine animala iar prepararea termica sau conservarea alimentelor nu distrug formele metabolic active.
Bibliografie:
- Insertul de lucru al reactivilor folositi;
- Procedura specifica de lucru, instructiuni de lucru, proceduri operationale si manualul calitatii laboratorului.
- Nicolov M, Cocora M, Buda V, Danciu C, Duse AO, Watz C, Borcan F. Hydrosoluble and Liposoluble Vitamins: New Perspectives through ADMET Analysis. Medicina (Kaunas). 2021 Nov 4;57(11):1204. doi: 10.3390/medicina57111204. PMID: 34833423; PMCID: PMC8622797.
- Sobczyńska-Malefora A, Delvin E, McCaddon A, Ahmadi KR, Harrington DJ. Vitamin B12 status in health and disease: a critical review. Diagnosis of deficiency and insufficiency – clinical and laboratory pitfalls. Crit Rev Clin Lab Sci. 2021 Sep;58(6):399-429. doi: 10.1080/10408363.2021.1885339. Epub 2021 Apr 21. PMID: 33881359.