Acid homovanilic urinar (uHVA)
NOTA – deoarece exista variatii ale excretiei renale ale analitului in functie de filtrarea glomerulara recomandarea laboratorului este de a folosi raportul acid homovanilic urinar / creatinina urinara (ambele determinari efectuate din urina spot) care permite calcularea excretiei urinare a acidului homovanilic, fara a mai fi necesara colectarea urinei pe 24h. Majoritatea creatininei urinare deriva din filtrarea glomerulara iar concentratia creatininei reflecta concentratia urinara a analitului per ansamblu. La copil (sau la pacientii non-complianti) daca nu se poate preciza volumul urinar in 24h, se recomanda determinarea raportului uHVA : uCRE (emisie spontana / spot).
- material biologic: urina (recipient de recoltare: urocultor); se intrerupe sau se specifica tratamentul medicamentos (medicatia cu aspirina, L-Dopa, insulina, nitroglicerina, rezerpina produce valori fals crescute iar medicatia cu clonidina, antidepresivele ce contin inhibitori de MAO produce valori fals scazute), se evita consumul de ceai, cafea, vanilie, cacao, ciocolata, banane, citrice, efortul fizic accentuat, stresul, postul alimentar (2-3 zile);
– pentru recoltarea urinei din 24h se procedeaza astfel: se colecteaza urina pe 24h intr-un recipient curat de 2 – 3 litri, se noteaza volumul urinar apoi se pune un esantion de 15 – 20 mL in urocultorul care ajunge la laborator;
– pentru determinarile din urina spot se recolteaza un esantion de urina din emise spontana (spot), preferabil prima urina de dimineata, care se pune in urocultor fara a mai fi necesara precizarea volumului urinar din 24h;
– dupa recoltare / receptie este necesara ajustarea pH-ului urinar la valori intre 2 – 5 folosind o solutie de acid acetic 5M (concentratie masica 30%) sau acid clorhidric 10M (concentratie masica 35 – 37%) cu verificarea pH-ului urinar dupa fiecare picatura;
– stabilitate proba – 5 zile la 2 – 8 grC (urina refrigerata acidifiata), 30 zile la – 20 grC (produs congelat);
- ;
- termen de executie: 5 – 7 zile.
Investigatie utila pentru screening-ul neuroblastomului secretant de dopamina; secundar, aceasta investigatie este utila si pentru diagnosticul altor tumori neuroendocrine secretante de catecolamine: feocromocitom, paragangliom.
In principal dozarea acidului homovanilic urinar este folosita pentru screening-ul si monitorizarea evolutiei neuroblastomului (cea mai frecventa tumora neuroendocrina la sugari si copii mici, cu evolutie rapid progresiva).
La copil, testele de prima intentie pentru diagnosticul neuroblastomului sunt determinarile urinare de acid vanilmandelic / metabolitul final al adrenalinei si noradrenalinei (uVMA – 24h respectiv uVMA – spot) precum si determinarile urinare de acid homovanilic / metabolitul final al dopaminei (uHVA – 24h si respectiv uHVA – spot).
La adult, testele de prima intentie pentru diagnosticul feocromocitomului sunt dozarea catecolaminelor plasmatice, dozarea metanefrinelor libere plasmatice, dozarea normetanefrinelor libere plasmatice precum si dozarea catecolaminelor urinare (urina 24h) si metanefrinelor urinare (urina 24h). Secundar, pentru diagnosticul feocromocitomului se pot folosi uVMA si uHVA. Dozarea catecolaminelor serice (plasmatice) si dozarea catecolaminelor urinare nu mai reprezinta „gold standard-ul” in diagnosticul feocromocitomului datorita secretiei intermitente si timpului scurt de injumatatire; sensibilitate si specificitate redusa cu rezultate fals pozitive respectiv fals negative.
Catecolaminele (adrenalina, noradrenalina, dopamina) sunt hormoni si neurotransmitatori produsi in conditii de stress de glandele suprarenale si de sistemul nervos. Metanefrinele (metanefrina și normetanefrina) sunt metaboliti intermediari / produsi de degradare intermediara ai catecolaminelor. Catecolaminele si metanefrinele pot fi detectate in sange / plasma si urina fiind folosite in diagnosticul unor tumori rare: tumori neuroendocrine secretante de catecolamine – feocromocitomul, paragangliomul. Investigatia screening de baza „gold standard” pentru diagnosticul feocromocitomului este dozarea metanefrinelor circulante si / sau urinare deoarece acesti compusi sunt mai stabili decat catecolaminele.
Acidul vanilmandelic (VMA) – este produsul final de eliminare al adrenalinei si noradrenalinei iar acidul homovanilic (HVA) – este produsul final de eliminare al dopaminei. Determinarea urinara a VMA si HVA este utila in diagnosticul unei tumori neuroendocrine frecvent intalnite la copii – neuroblastom. Determinarea uVMA / acid vanilmandelic urinar este utila pentru diagnosticul prezumtiv al neuroblastoanelor secretante de adrenalina si / sau noradrenalina. Determinarea uHVA / acid homovanilic urinar este utila pentru diagnosticul prezumtiv al neuroblastoanelor secretante de dopamina.
Alimentele bogate in tirozina sunt precursori ai catecolaminelor (dopamina, noradrenalina, adrenalina) si ai metabolitilor acestora (metanefrine, acid vanilmandelic, acid homovanilic). Inaintea acestui tip de determinari este importanta evitarea anumitor alimente ce pot determina valori fals crescute. Alimentele bogate in tirozina sunt: banane, avocado, citrice (portocale, lămâi, grapefruit), produse de cofetarie / patiserie (ciocolata, nuci, cacao, sake-uri proteice, ceai energizant, iaurturi aromate cu vanilie), banza maturata sau fermentata, carne afumata (inclusiv mezeluri, peste afumat), fasole (fava), lemn dulce (licorice).
Acidul homovanilic (HVA) este principalul metabolit final al dopaminei care este eliminat prin urina.
- uHVA este utilizat ca marker tumoral pentru diagnosticul si monitorizarea neuroblastomului. Neuroblastomul este un tip rar de cancer care se dezvolta din celulele nervoase imature (neuroblaste) ale sistemului nervos simpatic, fiind cea mai frecventa tumora solida extracraniana la copii (nou-nascuti, copii de obicei sub 5 ani). Neuroblastomul incepe in glandele suprarenale sau in abdomen si poate metastaza / poate invada toracele sau gatul. Evolutia este rapid progresiva.
-
secundar uHVA poate fi folosit si pentru diagnosticul feocromocitomului. Feocromocitomul este o tumora benigna rara a glandelor suprarenale care secreta in exces catecolamine (adrenalina, noradrenalina). Feocromocitomul apare la adultii tineri si poate fi asociat cu alte sindroame genetice iar tratamentul este chirurgical (extirpare tumorala). Tabloul clinic include crize paroxistice de hipertensiune arteriala.
-
pentru diagnosticul paraganglioamelor (tumori cu potential malign dezvoltate din celulele cromafine ce secreta catecolamine vasopresive adrenalina / noradrenalina) dozarea uHVA poate fi utila;
-
in cazul ganglioamelor (tumori benigne descoperite intamplator dezvoltate din celule gangionare mature care in majoritatea cazurilor nu secreta amine vasopresive) dozarea uHVA poate fi utila in diagnosticul diferential al masei tumorale.
Laboratorul exprima rezultatele in mg/24h (respectiv mg/g creatinina pentru determinarile din esantion spot – emisie spontana). Se poate folosi un factor de conversie pentru exprimari in alte unitati de masura.
1 mg/L x 5.49 = 5.49μmol/L (unitati SI – uHVA)
Intervalul normal de referinta reprezinta valorile gasite la 95% din populatia sanatoasa testata. Intervalele de referinta difera in functie de metoda analitica folosita (echipament, reactivi, tehnica de lucru) precum si de populatia pe care se face testarea; structura si caracteristicile grupului populational (varsta, sex, zona geografica, stil de viata) poate varia, afectand intervalul de referinta considerat „normal”.
valori de referinta uHVA raport uHVA : uCRE mg/g creatinina
- – nou-nascuti <1 an: < 30.0 mg/g creatinina
- – copii 1 an: < 35.0 mg/g creatinina
- – copii 2-4 ani: < 25.0 mg/g creatinina
- – copii 5-9 ani: < 15.0 mg/g creatinina
- – copii 10-14 ani: < 9.0 mg/g creatinina
- – tineri si adulti ≥15 ani: < 8.0 mg/g creatinina
valori de referinta uHVA – determinare pe 24h
- – tineri si adulti ≥15 ani: < 9 mg/24h
Bibliografie:
- Insertul de lucru al reactivilor folositi;
- Procedura specifica de lucru, instructiuni de lucru, proceduri operationale si manualul calitatii laboratorului.
Hwang N, Chong E, Oh H, Cho HW, Lee JW, Sung KW, Lee SY. Application of an LC-MS/MS Method for the Simultaneous Quantification of Homovanillic Acid and Vanillylmandelic Acid for the Diagnosis and Follow-Up of Neuroblastoma in 357 Patients. Molecules. 2021 Jun 7;26(11):3470. doi: 10.3390/molecules26113470. PMID: 34200415; PMCID: PMC8201085.